HPLC(High Performance Liquid Chromatography ),高效液相色谱。是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。
特点:
高效液相色谱法有“三高一广一快”的特点: 高效液相色谱HPLC流程示意
①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。 ②高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
③高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在uL数量级。
④应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。
⑤分析速度快、载液流速快:较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。
此外高效液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点,但也有缺点,与气相色谱相比各有所长,相互补充。高效液相色谱的缺点是有“柱外效应”。在从进样到检测器之间,除了柱子以外的任何死空间(进样器、柱接头、连接管和检测池等)中,如果流动相的流型有变化,被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽,柱效率降低。高效液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。
(本文转自色谱信息网 www.hplcs.com )
原发布者:jing2595832
液相色谱基础知识2017年04月11日一、什么是色谱色谱是一种分离工具,而不是传统意义上的分析仪器。色谱法也叫层析法,它是一种高效能的物理分离技术,将它用于分析化学并配合适当的检测手段,就成为色谱分析法。常见的分离方法:蒸馏、离心、电泳、过滤、超滤、等等。色谱法的发明人:俄国科学家:麦克海尔.塞蒙诺维奇.维茨特M.S.Tswett二、什么是液相色谱呢液相色谱HPLC液相色谱:流动相是液相柱色谱薄层色谱纸色谱三、什么是高效液相色谱HighPerformanceLiquidChromatography高效液相色谱法,简称:HPLC是一种区别于经典液相色谱;基于仪器方法的高效能分离手段。具有高性能的色谱柱,高精度、耐高压的输液泵以及高灵敏度的检测器。HPLC的分离原理、仪器配制和工作流程分离原理请单击动画演示请单击HPLC色谱柱数据处理系统进样器溶剂请单击色谱泵请单击检测器请单击废液四、高效液相色谱法的特点“三高一广一快”:①高压:对载液加高,流动相能迅速通过色谱柱压.②高效:分离效能高。③高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在uL数量级。④应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析。⑤分析速度快:较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15—30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。五、高效液相色谱法的主要类型及原理1、液-液分配色谱2、液-固吸附
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